MF熒光倒置顯微鏡的調整主要有哪些內容?
為了使
MF熒光倒置顯微鏡的視野能受到均勻而又充分的照明,在顯微鏡初次安裝和調試時,就必須把照明光路系統調整好,這是正確使用顯微鏡,并獲得正確、可靠結果的重要手段和基本的要求。
此外,正確掌握照明光路系統的調整,是使用過程中更換光源燈泡后所必經的步驟,也是在日常使用過程中不時地檢驗顯微鏡性能的必要手段。顯微鏡照明光路系統的調整主要有以下內容:
(1) 照明光源燈室在顯微外的初步調整
① 首先將燈室的外殼打開,壓彈簧夾子將鹵素燈泡裝入插座中,安裝時避免手指直接接觸燈泡(可用柔軟的布或紙隔?。?,以免燈泡上留有指紋等臟物,影響燈泡的使用壽命。
② 把燈室擺在桌面上,接通電源后,用的螺絲刀調節燈的調焦旋鈕孔(標有“←→”),使燈絲投影在1-2m外的墻上,將燈絲成像調至清晰;然后調節燈的高低位置調節絲孔(標有“──”),使MF熒光倒置顯微鏡燈絲位置高 低適當;再調節燈的左右位置調節螺絲孔(標有“──”),使燈絲左右位置合適。
(2) 光源發光體(燈絲)在顯微鏡內位置的檢驗和校正目的是為了把發光體的像端端正正地調入物鏡的視域范圍內,從光源的角度去確保的視域受到充分而均勻的照明,這是調整庫勒照明系統的前提條件,需要的 基本工具:對中望遠鏡購置顯微鏡時已配備。
MF熒光倒置顯微鏡觀察標本制作要求
1、載玻片。載玻片厚度應在0.8~1.2mm之間,太厚的載玻片,一方面光吸收多,另一方面不能使激發光在標本上聚集。載玻片必須光潔,厚度均勻,無明顯自發熒光,有時需用石英玻璃作為載玻片。
2、蓋玻片。蓋玻片厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強激發光,也可用干澀蓋玻片,這是一種特制的表面鍍有若干層對不同波長的光起不同干涉作用的物質(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過,而反射 激發光,這種反射的激發光可激發標本。
3、標本。組織切片或其他標本不能太厚,如太厚激發光大部分消耗在標本下部,而物鏡直接觀察到的上部不能被充分激發。另外,細胞重疊或雜質掩蓋,影響判斷。
4、封裱劑。封裱劑常用甘油,必須無自發熒光,無色透明,熒光的亮度在PH8.5~9.5時較亮,不易很快褪去。所以,常用甘油和0.5mol/L PH9.0~9.5的碳酸鹽緩沖液的等量混合液作封裱劑。
5、鏡油。一般用MF熒光倒置顯微鏡和油鏡觀察標本時,必須使用鏡油。好使用特制的無熒光鏡油,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對圖像質量略有影響。