熒光顯微鏡是用短波長的光線照射用熒光素染色過的被檢物體,使之受激發后而產生長波長的熒光,然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應用于生物,醫學等領域。
熒光顯微鏡的正確使用方法:
1.右手握住熒光顯微鏡鏡臂,左手托住鏡座。
2.把熒光顯微鏡放在實驗臺上,略偏左(顯微鏡放在距實驗臺邊緣7厘米左右處)。安裝好目鏡和物鏡。
3.轉動轉換器,使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。
4.把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開,同時畫圖)。轉動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡,可以看到白亮的視野。
5.把所要觀察的玻片標本(也可以用印有“6”字的薄紙片制成)放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。
6.轉動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(眼睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標本)。
7.左眼向目鏡內看,同時反方向轉動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉動細準焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
注意事項:
1、激發光長時間的照射,會發生熒光的衰減和淬滅現象,因此盡可能縮短觀察時間,暫時不觀察時,應用擋板遮蓋激發光。
2、作油鏡觀察時,應用"無熒光油"。
3、熒光幾乎都較弱,應在較暗的室內進行。
4、電源裝穩壓器,否則電壓不穩不僅會降低汞燈的壽命,也會影響鏡檢的效果。目前許多新興生物研究領域應用到熒光顯微鏡,如基因原位雜交(FISH)等等。